آنتی بادی خرگوشی ضد ایمونوگلوبین موش متصل شده به انزیم پراکسیداز

1- توليد كنژوكه آنزيمي آنتي بادي پلي كلونال گوسفندي ضد ايمونوگلوبولين انسان موسوم ugated Sheep Anti-Human lg - Peroxidase-Cor ، براي اولين بار در ايران توسط پژوهشگاه فن آوري هاي نوين علوم زيستي ابن سينا محقق شده است. 2- اين آنتي بادي از ايمونيزاسيون گوسفند با ايمونوگلوبولين انساني تخليص شده با ستون جذبي حاوي پروتئين A استرپتوكوك توليد شده است. درجه خلوص ايمونوكلوبولين انساني بيش از ٩۵ درصد مي باشد. 3- آنتي بادي اختصاصي موجود در سرم گوسفند ايمن شده با روشهاي كروماتوكرافي جذبي و با استفاده از ستون حاوي رزين متصل به ايمونوگلوبولين خالص انساني تخليص گرديد. آنتي بادي تخليص شده بيش از ٩۵ درصدخلوص دارد. 4- اين كنژوگه جهت استفاده در آزمون هاي مختلف منجمله ايمونوبلاتينگ، ايمونوسيتوشيمي و الايزا كاربرد دارد. 5- اين كنژوكه با سرم ميمون: ۵٠ درصد، سگ: 30 درصد , اسب، خوكچه هندي، رت: 15 درصد• موش و گربه: 10درصد . خركوش: 8 درصد , مرغ: ۵ درصد و با ايمونوگلوبولين بز هيچكونه واكنش متقاطعي ندارد. 6- اين كنژوكه در بافر فسفات سالين pH 2/7 و مولاريته 15 صدم حاوي ١ صدم تايمروسال و o/ol BSA يك درصد تا حداقل ٣ سال قابل نگهداري مي باشد. 7- درتوليد اين كنتوژگه هيچگونه دستكاري ژنيتيكي اعم از IN VIVO، IN VITRO صورت نگرفته و توليد آن مغايرتي با بند ماهد 4 قانون ثبت اختراعات، طرح هاي صنعتي و علائم تجاري ندارد.

نام فرآورده: Rabbit Anti-Human lg Mouse lg Adsorbed شماره فرآورده: 13 1 SPH مشخصات فرآورده: حيوان ميزبان: خرگوش ايمونوژن: ايمونوگلوبولين انسان lgA. lgM. IgG كه از طريق كروماتوگرافي جذبي Affinity chromatography بدست آمده است. نخليص آنتي بادي: ١ - آنتي بادي Rabbit Anti-Human lg از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از ايمونوكلوبولين انسان متصل به Sepharose-4B تخليص گرديد. ٢ - واكنش متقاطع آن با ايمونوگلوبولين موش با استفاده از ستون جذبي Mouse lg حذف گرديد. غلظت بروتثيئ: نيم mg/ml واكنش متقاطع با سرم حيوانات: ميزان واكنش متقاطع با سرم ميمون حدود ١٠٠ درصد، سگ: 5/12 درصد اسب : 10 درصد بز: 6 درصد، 4رت: درصدگوسفند: 3 درصد خوكچه هندي و گربه: 1/5 موش: 1 درصد و با سرم مرغ كمتر از ١ دصد مي بامئند. موارد استفاده: ١ - الايزا Enzyme-linked mmunosorbent Assay ٢ - ايمونوديفوزيون Immunodiffusion 3~ هماكلوتيناسيون Haemagglutination نحوه نگهداري: آنتي بادي را در ويالهاي كوچك در ºc • ٢ - نكهداري كرده و از منجمد كردن و ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. كيفيت اين فرآورده به تاييد آزمايشكاه رفرانس وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي رسيده است.

خلاصه نام فرآورده: SPH 122 مشخصات فراورده حيوان ميزبان : گوسفند ايمونوژن: زنجيره سنگين IgD مولكول IgD انسان از سرم تصفيه شده سنگين آن، بعد از احيا IgD با استفاده از روش الكترو الوشن به دست آمده است. تخليص آنتي بادي: آنتي بادي sheep anti human IgD از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از IgD انسان متصل به sepharose-4B نحليص گرديد. غلظت پروتئين: mg/ml 5/0 حلال: PBS 1.5M و ph 7/2 واحد تايمروسال 01/0 واكنش متقاطع 1. واكنش متقاطع با ساير ايزوتيپ هاي انسان ميزان واكنش متقاطع با IgG 5/0 و با IgG: 5% و يا IgM/K,IgA/ . IgA/K 3% مي باشد. 2. واكنش متقاطع با سرم حيوانات: هيچگونه واكنش متقاطعي با سرم ميمون، گوسفند، بز، اسب، مرغ، سگ، گربه، خوكچه هندي، رت و موش ندارد. موارد استفاده: 1. آلايزا enzyme – linked immunosorbent assay 2. ايمونوديفوزيون immunodiffusion 3. هماگلوتيناسيون haemagglitination نحوه نگهداري آنتي بادي را در ويالهاي كوچك در 20- درجه سانتيگراد نگهداري كرده و از منجمد كردن و ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. كيفيت اين فراورده به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي رسيده است.

آنتي بادي هاي پلي كلونال ، محصول كلون هاي متفاوتي از لنفوسيت هاي B هستند كه در پاسخ به آنتي ژن توليد مي شوند و به اپي توپ هاي گوناگون ايمونوژن متصل مي گردند. اين آنتي بادي ها به دنبال ايمونيزاسيون يك حيوان كه معمولا خرگوش، گوسفند و يا بز است، توليد مي گردند. مزيت مهم آنتي بادي هاي پلي كلونال در خصوصيت آنها براي تشكيل كمپلكس هاي ايمني نامحلول بزرگ با آنتي ژن يا آگلوتينه كردن سلول ها مي باشد. اين آنتي بادي ها از ايزوتيپ هاي متفاوت تشكيل شده و ناهمگن مي باشند و از نظر ميل پيوندي در طيف وسيعي قرار گرفته و اتصال آنها به آنتي ژن ويژه شان تحت طيف وسيعي از PH (9-4) و غلظت (1-0 مولار ) نمك طعام پايدار است. با توجه به اينكه در اكثر تستهاي تشخيصي و تحقيقاتي ، آنتي بادي هاي پلي كلونال از ابزارهاي اصلي بوده و كاربرد بسيار وسيعي در زمينه تحقيق و تشخيص دارند، لذا ساخت و توليد اين مواد با توجه به نيازهاي مختلف بسيار حايز اهميت است. اين آنتي بادي ها در الايزا ، ايمونوديفوزيون ، هماگلوتيتاسيون و آنتي بادي هاي نشاندار شده با ماده فلورسانس در زمينه هاي ايمونوهيستوشيمي ، ايمونوفلورسانس و آنتي بادي هاي نشاندار شده با آنزيم در ايمونوبلات ، الايزا و ايمونوسيتوشيمي كاربرد دارند. به همين دليل ، بسياري از اين آنتي بادي هاي در كيت هاي تشخيص طبي استفاده مي شوند. با توجه به اينكه بررسي ميزان IgM انساني در سرم و مايعات بدني برخي بيماران بسيار اهميت دارد؛ لذا نياز وسيعي به كنژوگه آنزيمي آنتي بادي پلي كلونال گوسفندي ضد ايمونوگلوبولين IgM انسان احساس مي شد. توليد اين كنژوگه آنزيمي موسوم به آنتي بادي گوسفندي ضد ايمونوگلوبولين IgM انسان، كنژوگه شده با آنزيم پروكسيداز Peroxidase Conjugated Sheep Anti Human IgM براي اولين بار در ايران توسط پژوهشگاه فن آوري هاي نوين علوم زيستي جهاد دانشگاهي ابن سينا انجام شد.

خلاصه نام فرآورده: peroxidase conjugated rabbit anti – sheep Ig شماره فرآورده: SPH 224 مشخصات فرآورده: حيوان ميزبان : خرگوش ايمونوژن : ايمونوگلوبين گوسفند كه از طريق كروماتوگرافي جذبي (affinity chromatography بدست آمده است. تخليص آنتي بادي : آنتي بادي rabbit anti – sheep Ig از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از ايمونوگلوبين گوسفند متصل به sepharose – 4B تخليص گرديد. كونژوگاسيون: كونژوگاسيون آنتي بادي با HRP (horseradish peroxidase) از طريق روش پريودات با قدري تغييرات انجام گرفت. غلظت آنتي بادي: 1 mg/ml حلال: PBS(ph 7/2 , 0/15M) واجد BSA 1% وتايمروسال 01/0 % واكنش متقاطع با سرم حيوانات: ميزان واكنش با سرم بز 100% ، اسب وسگ : بيش ار 5/12 درصد ، ميمون 10% ، انسان : بيش از 6% ، خوكچه هندي : بيش از 3% ، موش 3% و با سرم مرغ كمتر از 1% مي باشد. موارد استفاده: 1. ايمونوسيتي شيمي immunocytochemistry 2. ايمونوبلاتينگ immunoblotting 3. الايزا enzyme – linked immunosorbent رقت مورد استفاده در الايزا: 1:1000 رقت مورد استفاده در الايزا با استفاده از پليت پوشيده شده با ايمونوگلوبين گوسفند با غلظت 10 µg/ml در آزمون الايزاي مستقيم بدست آمده است. مبناي انتخاب رقت كنژوله ايجاد OD حداقل 5/1 بعداز توقف واكنش و قرائت نتايج با فيلتر 492 نانومتر بوده است. نحوه نگهداري: آنتي بادي در ويالهاي كوچك در 20- درجه سانتيگراد نگهداري كرده و از منجمد كردن و ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. كيفيت اين فرآورده به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي رسيده است.

نام فراورده : peroxidase conjugated sheep anti mouse Ig شماره فراورده: SPH 101 مشخصات فرآورده حيوان ميزبان: گوسفند ايمونوژن: ايمونوگلوبين موش كه از طريق كروماتوگرافي جذبي (affinity chromatography) بدست آمد. تخليص آنتي بادي: آنتي بادي sheep anti mouse Ig از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از Ig موش متصل به sepharose-4B تخليص گرديد. كونژوگاسيون: كونژوگاسيون آنتي بادي با HRP(horseradish peroxidase) از طريق روش پريودات با قدري تغييرات انجام گرفت. غلظت آنتي بادي: 1/13 mg/ml حلال: PBS(ph 7/2 0/15M) واحد BSA 1% و تايمروسال 01/0 % واكنش سرم با سرم حيوانات: ميزان واكنش متقاطع با سرم رت: 50%، خوكچه هندي 25% ، گ كمتر از 25% ، انسان 5% ، گربه واسب 2% ، مرغ 1% و با سرم خرگوش كمتر از 1% مي باشد. موارد استفاده: 1. ايمونوسيتي شيمي immunocytochemistry 2. ايمونوبلاتينگ immunoblotting 3. الايزا enzyme – linked immunosorbent assay رقت مورد استفاده در الايزا: 1:750 رقت مورد استفاده در الايزا با استفاده از پليت پوشيده شده با ايمونوگلوبولين موش با غلظت 10 µg/ml در آزمون الايزاي مستقيم بدست آمد. مبناي انتخاب رقت كونژوله ايجادOD حداقل يك سال و نيم بعد از توقف واكنش و قرائت نتايج با فيلتر 492 نانومتر بوده است. نحوه نگهداري: آنتي بادي را در ويال هاي كوچك در 20- درجه سانتيگراد نگهداري كرده و از منجمد كردنو ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. كيفيت اين فرآورده به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت درمان و آموزش پزشكي رسيده است.

‏مشخصات فرآورده: ‏حيوان ميزبان: گوسفند ايمونوژن : زنجيره سنگين IgG مولكول IgG با استفاده از سرم كروماتوگرافي جذبي (Affinity chromatography) از سرم تصفيه شد و زنجيره سنگين آن، بعد از احياء lgG ‏ با استفاده از روش الكتروالوشن بدست آمد. ‏تخليص آنتي بادي :Sheep Anti-Human IgG ‏از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از IgG ‏ انسان متصل به Sepharose-4B ‏تخليص گرديد. ‏كونژوگاسيون: كونژوگاسيون آنتي بادي با Horseradish Peroxidase) HRP ‏) از طريق روش پريودات( ١٩٧٨ Wilson, Nakane ‏) با قدري تغييرات انجام گرفت. غلظت آنتي بادي: mg/ml 59/0 حلال: PBS (PH :7/2 0/15 M) واجد BSA 1% و تايمروسال 01/0% ‏واكنش متقاطع: ١ ‏- واكنش متقاطع با ساير ايزوتيپ هاي انسان: واكنش متقاطع آن قبل از كونژوگاسيون با --- و با lgM/K ‏ و IgA/K ‏ كمتر از 1% بوده است. ٢ ‏- واكنش متقاطع با سرم حيوانات: ميزان واكنش متقاطع قبل از كونژوگاسيون با سرم ميمون: ١٠٠ ‏%، سگ: 50% خوكچه هندي بيش از5/12 % اسب، رت، موش، گربه:5/12%، خرگوش كمتر از3% و با سرم مرغ واكنش متقاطع نداشته است. موارد استفاده ايمونوسيتوشيمي Immunocytochemistry ايمونوبلاتينگ Immunoblottting الايزا Enzyme – Linked Immunosorbent ‏رقت مورد استفاده در الايزا: 1:750 ‏رقت مورد استفاده در الايزا با استفاده از پليت پوشيده شده با lgG ‏تصفيه شده يه ميزان µg/ml ١٠ ‏در آزمون الايزاي ‏مستقيم بدست آمد. مبناي انتخاب رقت كونژوگه ايجاد OD ‏ حداقل 5/1 بعد از توقف واكنش و قرائت نتاج با فيلتر ۴٩٢ ‏نانومتر بوده است. ‏نحوه نگهداري: آنتي بادي را در ويالهاي كوچك در ºc ‏• ٢ ‏- نگهداري كرده و از منجمد كردن و ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. ‏كيفيت اين فرآورده به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي رسيده است.

‏خلاصه توصيف حيوان ميزبان: گوسفند ‏ايمونوژن: ايمونوگلوبولين انسان كه از طريق كروماتوگرافي جذبي( affinityChromatography ‏) تخليص گرديد. تلخيص آنتي بادي: آنتي بادي Sheep Anti- Human lg ‏از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از ايمونوگلوبولين انسان متصل به b۴ ‏- Sepharose ‏تخليص گرديد. ‏غلظت: mg/ml ‏1 واكنش متقاطع با سرم ‏ساير حيوانات:.ميزان واكنش متقاطع با سرم ميمون: بيش از ٢۵ ‏%، سگ: 6% رت، خوكچه هندي و اسب:3% موش: 2%گربه و خرگوش:5/1% و با سرم مرغ كمتر از ١ ‏% مي باشد. ‏موارد ‏استفاده: ‏ا- الايزا Ezyme- Linked Innunosorbent Assay ‏ 2-ايمونوديفوزيون Immunodiffusiom ٣ ‏-هماگلوتيتاسيون Heamagglutinatiôn ‏نحوه نگهداري: انتي بادي را در ويال هاي كوچك در c ٢٠ ‏- نگهداري كرده و از منجمد كردن و ذوب كردن آن به طور متناوب خودداري كنيد. كيفيت اين فرآورده، به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي رسيده است. ‏

خلاصه آنتي بادي گوسفندي ضد ايمونوگلوبين IgG انسان آنتي بادي هاي پلي كلونال، محصول كلون هاي متفاوتي از لنفوسيت هاي B هستند كه در پاسخ به آنتي ژن توليد مي شوند و به اپي توپ هاي گوناگون ايمونوژن متصل مي گردند. اين آنتي بادي ها به دنبال ايمونيزاسيون يك حيوان كه معمولا خرگوش، گوسفند و يا بز است، توليد مي گردند. مزيت مهم آنتي بادي پلي كلونال در خصوصيت آنها براي تشكيل كمپلكس هاي ايمني نامحلول بزرگ با آنتي ژن يا آگلوتينه كردن سلول ها مي باشد. اين آنتي بادي ها از ايزوتيپ هاي متفاوتي تشكيل شده و ناهمگن مي باشند و از نظر ميل پيوندي در طيف وسيعي قرار گرفته و اتصال آنها به آنتي ويژه شان، تحت طيف وسيعي از ph (9 – 4) و غلظت (1- 0مولار) نمك طعام پايدار است. با توجه به اينكه در اكثر تست هاي تشخيصي و تحقيقاتي، آنتي بادي هاي پلي كلونال از ابزارهاي اصلي بوده و كاربرد وسيعي در زمينه تحقيق و تشخيص دارند، لذا ساخت و توليد اين مواد با توجه به نيازهاي مختلف بسيار حايز اهميت است. اين آنتي بادي ها در الايزا، ايمونوديفوزيون، هماگلوتيناسيون و آنتي بادي هاي نشاندار شده با ماده فلورسانس در زمينه هاي ايمونوهيستوشيمي، ايمونوفلورسانس و آنتي بادي هاي نشان دار شده با آنزيم در ايمونوبلات، الايزا و ايمونوسيتوشيمي كاربرد دارند. به همين دليل بسياري از اين آنتي بادي ها در كيت هاي تشخيص طبي استفاده مي گردند. 1. با توجه به اينكه بررسي ميزان IgG انساني در سرم و مايعات بدني برخي بيماران بسيار اهميت دارد، نياز وسيعي به آنتي بادي پلي كلونال گوسفندي ضد ايمونوگلوبولين IgG انسان احساس مي شد. توليد آنتي بادي گوسفندي ضد ايمونوگلوبولين IgG انسان موسوم به sheep anti human IgG توسط پژهشگاه فن آوريهاي نوين علوم زيستي جهاد دانشگاهي ابن سينا انجام شده است.